傳統(tǒng)的光學顯微鏡使用的是場光源,標本上每一點的圖像都會受到鄰近點的衍射或散射光的干擾;激光顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點光源對標本內(nèi)焦平面的每一點掃描,標本上的被照射點,在探測針孔處成像,由探測針孔后的光點倍增管或冷電耦器件逐點或逐線接收,迅速在計算機監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點同時聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔,焦平面以外的點不會在探測針孔處成像,這樣得到的共聚焦圖像是標本的光學橫斷面,克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點。
激光顯微鏡的特點:
1、對活細胞和組織或細胞切片進行連續(xù)掃描,可獲得精細的細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統(tǒng)的三維圖像。
2、可以得到比普通熒光顯微鏡更高對比度、高解析度圖像、同時具有高靈度、杰出樣品保護。
3、多維圖像的獲得,時間序列掃描旋轉掃描、區(qū)域掃描、光譜掃描、同時方便進行圖像處理。
4、細胞內(nèi)離子熒光標記,單標記或多標記,檢測細胞內(nèi)如PH和鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及動態(tài)變化。
5、熒光標記探頭標記的活細胞或切片標本的活細胞生物物質,膜標記、免疫物質、免疫反應、受體或配體,核酸等觀察;可以在同一張樣品上進行同時多重物質標記,同時觀察;
6、對細胞檢測無損傷、精確、準確、可靠和優(yōu)良重復性;數(shù)據(jù)圖像可及時輸出或長期儲存。